Pesquisadores chineses restauraram temporariamente a produção de espermatozoides em camundongos inférteis por causas genéticas ao injetar nanopartículas lipídicas contendo mRNA diretamente nos testículos. O experimento gerou um filhote vivo sem que o material genético terapêutico se integrasse ao DNA dos animais.
Como foi feito
A equipe da Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, em colaboração com universidades de Shenzhen e Nanjing, descreve o método na revista Advanced Science. Os cientistas produziram 30 formulações de nanopartículas lipídicas (LNPs) e escolheram a que entregou mRNA de forma mais eficiente às espermatócitos — células que realizam a meiose — batizada de LNP3.
O mRNA carregava o gene selvagem Msh5, cuja mutação (Msh5-D486Y/D486Y) provoca bloqueio total da meiose e ausência de espermatozoides, quadro equivalente à azoospermia não obstrutiva em humanos.
Resultados no modelo Msh5
Duas semanas após a microinjeção pelo rete testis, surgiram espermátides redondas; na terceira semana, células alongadas com morfologia normal. A análise por citometria apontou 55,9 % de células haploides, contra praticamente zero nos animais não tratados. Cerca de 32 % dos túbulos seminíferos exibiam espermátides com acrossoma íntegro.
O efeito durou poucos dias, coerente com a degradação natural do mRNA. Sequenciamento de dez espermatozoides mostrou que todos mantinham a mutação original, comprovando ausência de integração genômica.
Filhote obtido por ICSI
Para testar a fertilidade, os pesquisadores usaram a técnica de injeção intracitoplasmática de espermatozoide (ICSI). Entre 53 oócitos saudáveis, 30 atingiram o estágio de blastocisto. Um embrião transferido a fêmea receptora resultou em um filhote vivo, heterozigoto para a mutação — o esperado quando apenas o óvulo é normal.
Imagem: Nanowerk https
Segunda mutação e segurança
O mesmo protocolo, agora levando mRNA do gene Maps, também desbloqueou a espermatogênese em camundongos que careciam desse gene: 29,5 % dos cortes de túbulo continham espermátides no 21.º dia. Exames histológicos de coração, fígado, baço, pulmões, rins e cérebro não detectaram toxicidade, e a citocina inflamatória IL-1β permaneceu estável.
Limitações e próximos passos
Os autores observam que apenas um nascimento foi obtido, que o mRNA sintético não possui modificações químicas naturais e que a injeção no rete testis precisa ser adaptada para uso clínico. Ainda assim, o estudo demonstra um caminho não viral e não integrativo para tratar formas graves de infertilidade masculina causadas por erros genéticos na meiose.
Com informações de Nanowerk
